高等学校化学学报 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (12): 2817.
王瑞俭1,2, 郑良玉1, 杨雪莹1, 杨晔1, 王晓娟1, 曹淑桂1
WANG Rui-Jian1,2, ZHENG Liang-Yu1*, YANG Xue-Ying1, YANG Ye1, WANG Xiao-Juan1, CAO Shu-Gui1*
摘要: 以中国春小麦幼苗为材料, 克隆构建了小麦质体乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的羧基转移酶(CT)重组质粒(RCP18-5), 并实现了重组质粒在大肠杆菌中的可溶性高表达. 对重组蛋白的性质研究表明, 该蛋白具有较强的疏水性, 稳定性不高. 为改善这种状况, 对CT功能域基因进行了截短和延长, 同样于大肠杆菌中进行表达. 结果表明, 仅长度为2325 bp的完整CT功能域基因能以可溶形式表达; 2109 bp基因可表达, 但是以包涵体形式存在; 而1869 bp及3501 bp基因则不能表达. 通过圆二色光谱及差热扫描分析对纯化的CT功能域蛋白与除草剂的相互作用进行研究表明, 在除草剂存在下, CT蛋白的光谱发生显著变化, 说明除草剂与可溶性蛋白之间存在较强的相互作用.
中图分类号:
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