基于聚合酶反应和发夹型核酸适体的蛋白质荧光检测新方法

高等学校化学学报

基于聚合酶反应和发夹型核酸适体的蛋白质荧光检测新方法

郭秋平, 羊小海, 王柯敏, 孟祥贤, 李军, 谭蔚泓

湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室, 生物医学工程中心, 生命科学与技术研究院, 化学化工学院, 生物纳米与分子工程湖南省重点实验室, 长沙 410082

收稿日期:2007-06-05 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-01-10 发布日期:2008-01-10
通讯作者: 王柯敏

Novel Fluorescent Method of Protein Detection Using Hairpin Nucleic Acid Aptamer Based on Polymerase Reaction

GUO Qiu-Ping, YANG Xiao-Hai, WANG Ke-Min*, MENG Xiang-Xian, LI Jun, TAN Wei-Hong

State Key of Laboratory of Chemo/biosensing and Chemomertrics, Biomedical Engineering Center, Institute of Biological Science and Technology, College of Chemistry and Chemical Engineering, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecule Engineering of Hunan Province, Hunan University, Changsha 410082, China

Received:2007-06-05 Revised:1900-01-01 Online:2008-01-10 Published:2008-01-10
Contact: WANG Ke-Min

摘要/Abstract

摘要： 设计合成了一种发夹型核酸适体(Aptamer), 结合聚合酶反应建立了蛋白质荧光分析新方法. 该核酸适体同时作为蛋白质配体和聚合反应模板, 与靶蛋白特异结合后, 其构象发生了变化, 启动聚合反应, 从而在未直接标记核酸适体的情况下, 通过监测聚合反应进程来检测蛋白质的浓度. 采用该方法检测凝血酶的线性范围为0.5~8 nmol/L, 检测下限为0.5 nmol/L, 为蛋白质检测提供了一种简便快速的非直接标记的荧光分析方法, 有望在蛋白质组学的研究中得到广泛的应用.

关键词: 核酸适体, 蛋白质检测, 聚合酶反应, 凝血酶

Abstract: Aptamers are a new class of oligonucleotides generated from in vitro selection with a high affinity and specificity to targets. In this paper, a novel fluorescent method of protein detection was developed via hairpin aptamer based on polymerase reaction. The hairpin aptamer was designed as protein ligand and template of the polymerase reaction. When the aptamer was bound to the target protein, it would change to a linear strand and induce the polymerase reaction. Then protein detection was carried out by monitoring the polymerase reaction without directly labeling with the aptamer, with a linear range of 0.5—8 nmol/L and detection limit of 0.5 nmol/L. This proposed method has a potential advantage to design other protein probe with linear aptamer with a complex structure and can be used as a simple and general tool for protein detection.

Key words: Aptamer, Protein detection, Polymerase reaction, Thrombin

中图分类号:

O657
O629.73

TrendMD:

郭秋平, 羊小海, 王柯敏, 孟祥贤, 李军, 谭蔚泓 . 基于聚合酶反应和发夹型核酸适体的蛋白质荧光检测新方法. 高等学校化学学报, doi: .

GUO Qiu-Ping, YANG Xiao-Hai, WANG Ke-Min*, MENG Xiang-Xian, LI Jun, TAN Wei-Hong. Novel Fluorescent Method of Protein Detection Using Hairpin Nucleic Acid Aptamer Based on Polymerase Reaction. Chem. J. Chinese Universities, doi: .

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