在线衍生微流控芯片电泳和激光诱导荧光法测定单细胞中谷胱甘肽

高等学校化学学报 ›› 2004, Vol. 25 ›› Issue (S1): 167.

在线衍生微流控芯片电泳和激光诱导荧光法测定单细胞中谷胱甘肽

凌云扬, 殷学锋, 方肇伦

浙江大学化学系微分析系统研究所, 杭州 310027

出版日期:2004-12-31 发布日期:2004-12-31
通讯作者: 殷学锋(1945年出生),男,教授,博士生导师,主要从事微流控分析芯片研究
基金资助:
国家自然科学基金重大项目(批准号:20299030)资助.

On-Chip Derivatization for Determining Glutathione in Single Cell Using Microchip Electrophoresis and Laser Induced Fluorescence Detection

LING Yun-Yang, YIN Xue-Feng, FANG Zhao-Lun

Institute of Microanalysis System, Department of Chemistry, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China

Online:2004-12-31 Published:2004-12-31

摘要/Abstract

摘要：

微流控分析芯片的网络结构和微米通道尺寸适合于单细胞进样、控制和分离分析^[1~4].在测定细胞内容物时,大多采用柱前细胞内衍生法^[1,2,4],但操作复杂,需多次离心分离,且能透过细胞膜标记胞内组分的荧光试剂较少.

关键词: 在线衍生, 微流控芯片, 单细胞, 谷胱甘肽

Abstract:

A simple method for the detection of glutathione(GSH) in single human erythrocyte was developed by using on-chip labeling by adding the 2,3-naphthalene-dicarboxaldehyde(NDA) simply in microchip electrophoresis buffer,with functional integration of cell sampling,single cell loading docking,lysing,dynamic labeling,electrophoresis separation and LIF detection.After lysing,the reaction between the released GSH and NDA included in electrophoresis buffer can be completed within a migrating distance of 0.5 cm in separation channel during electrophoresis.The average separation efficiency for GSH was 2.4×10⁶ plates/m) which was not significantly different from off-chip derivatization.The GSH migration time on the on-chip mode and off-chip method were 116 s and 110 s,respectively.The present method can minimize the dilution of the contents of single cell during derivatization,simplify the cell treatment and save the sample and reagent.A half life of 5 days of GSH in human erythrocyte was found by using this method.

Key words: On-chip derivatizatian, Microfluidic chip, Single cell, Glutathione

TrendMD:

凌云扬, 殷学锋, 方肇伦. 在线衍生微流控芯片电泳和激光诱导荧光法测定单细胞中谷胱甘肽. 高等学校化学学报, 2004, 25(S1): 167.

LING Yun-Yang, YIN Xue-Feng, FANG Zhao-Lun. On-Chip Derivatization for Determining Glutathione in Single Cell Using Microchip Electrophoresis and Laser Induced Fluorescence Detection. Chem. J. Chinese Universities, 2004, 25(S1): 167.

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