白术多糖调节IEC-6细胞迁移活性成分的分离和表征

doi:10.7503/cjcu20140515

高等学校化学学报 ›› 2015, Vol. 36 ›› Issue (2): 299.doi: 10.7503/cjcu20140515

白术多糖调节IEC-6细胞迁移活性成分的分离和表征

王一寓^1,², 刘嘉炜¹(), 司马贞华¹, 宋厚盼², 李茹柳², 蔡佳仲², 陈蔚文^1,²

1. 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心, 岭南中药资源教育部重点实验室, 广州 510006
2. 广州中医药大学脾胃研究所, 广州 510405

收稿日期:2014-06-06 出版日期:2015-02-10 发布日期:2015-01-20
作者简介:联系人简介: 刘嘉炜, 男, 博士, 副研究员, 主要从事生物有机和天然药物化学研究. E-mail: jiawei.liu@ymail.com
基金资助:
国家自然科学基金(批准号: 81373432, 811732540)、广州市科技计划项目基金(批准号: 20104425120006)、中央财政支持地方高校发展专项“重大难治性脾胃病防治协同创新平台”(批准号: 财教[2013]338号)和广州中医药大学中医内科学特色重点学科建设项目(批准号: 财教[2010]353号)资助

Isolation, Structural Characterization and IEC-6 Cell Migration Activities of Polysaccharides From Atractylodes Macrocephala Koidz^†

WANG Yiyu^1,², LIU Jiawei^1,^*(), SIMA Zhenhua¹, SONG Houpan², LI Ruliu^2,^*, CAI Jiazhong², CHEN Weiwen^1,²

1. Key Laboratory of Chinese Medicinal Plant Resource from Lingnan, Ministry of Education, Research Center of Medicinal Plant Resource Science and Engineering, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
2. Piwei Institute, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, China

Received:2014-06-06 Online:2015-02-10 Published:2015-01-20
Contact: LIU Jiawei,LI Ruliu E-mail:jiawei.liu@ymail.com
Supported by:
Supported by the National Natural Science Foundation of China(Nos.81373432, 811732540), Guangzhou Science and Technology Program, China(No.20104425120006), the Special Funds from Central Finance of China in Support of the Development of Local Universities and Colleges, China(No.2013-338) and the Special Grant of Guangzhou University of Chinese Medicine, China(No.2010-353)

摘要/Abstract

摘要：

基于药理活性导向法, 利用水提醇沉、 DEAE纤维素柱和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等分离技术从白术根部位筛选分离出1个新的多糖组分YY13008, 并利用酸水解、凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术、环境扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振波谱(NMR)等表征了其分子结构. 表征结果表明, YY13008为线团型均一性多糖组分, 绝对分子量为6546, 其分子结构是由大量果糖单元以β(2→1)果糖苷键, 终末端以α(1→2)葡萄糖苷键连接构成的果聚糖. 体外伤口愈合细胞模型测试结果表明, 白术多糖组分YY13008可使由α-二氟甲基鸟氨酸所致的IEC-6细胞迁移抑制恢复至正常水平, 而其自身对IEC-6细胞迁移无明显影响.

关键词: 白术, 多糖, 果聚糖, 细胞迁移

Abstract:

Bioassay-guided fractionation led to isolation of a new polysaccharide YY13008 from the roots of Atractylodes macrocephala Koidz by aqueous extraction, ethanol precipitation and purification followed by column chromatography on DEAE-cellulose and sephadex LH-20. The chemical structure of polysaccharide YY13008 was then elucidated on the basis of acidic hydrolysis, environmental scanning electron microscope and spectroscopic data, including IR, 1D and 2D NMR analysis. The polysaccharide YY13008 was determined as homogeneous, with a molecular weight of 6546, as determined by a gel permeation chromatography-multi-angle laser light scattering(GPC-MALLS) method. The polysaccharide YY13008 was found to be a fructan containing almost exclusively a(2→1) -linked β-D-fructofuranosyl repeating units with terminal α-glucopyranosyl unit. The in vitro wound healing assays revealed that the treatment of polysaccharide YY13008 with difluoromethylornithine(DFMO), a specific inhibitor of ornithine decarboxylase, was able to completely reverse DFMO-induced inhibition of IEC-6 migration, however, the treatment of YY13008 alone did not affect the basal rate of IEC-6 migration.

Key words: Atractylodes macrocephala Koidz, Polysaccharide, Fructan, Cell migration

中图分类号:

O631.6

TrendMD:

王一寓, 刘嘉炜, 司马贞华, 宋厚盼, 李茹柳, 蔡佳仲, 陈蔚文. 白术多糖调节IEC-6细胞迁移活性成分的分离和表征. 高等学校化学学报, 2015, 36(2): 299.

WANG Yiyu, LIU Jiawei, SIMA Zhenhua, SONG Houpan, LI Ruliu, CAI Jiazhong, CHEN Weiwen. Isolation, Structural Characterization and IEC-6 Cell Migration Activities of Polysaccharides From Atractylodes Macrocephala Koidz^†. Chem. J. Chinese Universities, 2015, 36(2): 299.

图/表 3

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	(Ed.: P, H, Y, K)

Species	No.	Chicory inulin^[19]	δ, ¹³C NMR	HSQC(¹³C ×¹H)	COSY(¹H ×¹H)	HMBC(¹³C→¹H)
β-D-fructofuranosyl	1	60.33	60.8	3.64(d, J=0.8 Hz)		3-H
(2→1)				3.85(d, J=10.8 Hz)
	2	102.65	103.2			3-H, 1-Ha, 1-Hb
	3	76.42	77.1	4.19(d, J=8.5 Hz)	4-H	4-H, 1-Hb,1-Ha
	4	73.32	74.3	4.03(t, J=8.2 Hz)	3-H, 5-H	3-H,5-H,6-H
	5	80.5	81.1	3.79(m, +)	4-H, 6-H	4-H,6-H
	6	61.66	62.2	3.69(m, +)	5-H	4-H,5-H
Terminal	1	91.89	92.5	5.37(d, J=3.0 Hz)
α-D-glucopyranosyl	2	70.60	71.2	ND
(1→2)	3	72.03	72.6	ND
	4	68.66	69.2	3.40(t, J=9.6 Hz)
	5	71.85	72.4	3.48(m)
	6	59.57	61.0	ND
(Terminal α-D-glc→)	1		60.5	ND
β-D-fructofuranosyl	2		103.7	ND
(1→2)	3		77.3	ND
	4		73.9	ND
	5		81.3	ND
	6		62.3	ND

Species	No.	Chicory inulin^[19]	δ, ¹³C NMR	HSQC(¹³C ×¹H)	COSY(¹H ×¹H)	HMBC(¹³C→¹H)
β-D-fructofuranosyl	1	60.33	60.8	3.64(d, J=0.8 Hz)		3-H
(2→1)				3.85(d, J=10.8 Hz)
	2	102.65	103.2			3-H, 1-Ha, 1-Hb
	3	76.42	77.1	4.19(d, J=8.5 Hz)	4-H	4-H, 1-Hb,1-Ha
	4	73.32	74.3	4.03(t, J=8.2 Hz)	3-H, 5-H	3-H,5-H,6-H
	5	80.5	81.1	3.79(m, +)	4-H, 6-H	4-H,6-H
	6	61.66	62.2	3.69(m, +)	5-H	4-H,5-H
Terminal	1	91.89	92.5	5.37(d, J=3.0 Hz)
α-D-glucopyranosyl	2	70.60	71.2	ND
(1→2)	3	72.03	72.6	ND
	4	68.66	69.2	3.40(t, J=9.6 Hz)
	5	71.85	72.4	3.48(m)
	6	59.57	61.0	ND
(Terminal α-D-glc→)	1		60.5	ND
β-D-fructofuranosyl	2		103.7	ND
(1→2)	3		77.3	ND
	4		73.9	ND
	5		81.3	ND
	6		62.3	ND

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