基于SERS的大鼠脑组织免疫分析

doi:10.7503/cjcu20150635

高等学校化学学报 ›› 2015, Vol. 36 ›› Issue (11): 2317.doi: 10.7503/cjcu20150635

基于SERS的大鼠脑组织免疫分析

杨津^1,², 刘卓³, 苏虹羊¹, 彭茹², 宋薇¹, 赵冰¹()

1. 吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室, 长春 130012
2. 吉林大学基础医学院, 长春 130021
3. 吉林大学中日联谊医院血管外科, 长春 130021

收稿日期:2015-08-11 出版日期:2015-11-10 发布日期:2015-10-26
作者简介:联系人简介: 赵冰, 男, 博士, 教授, 博士生导师, 主要从事光谱分析研究. E-mail:zhaob@jlu.edu.cn
基金资助:
国家自然科学基金(批准号: 21273091, 21221063, 21327803, 21411140235)和吉林省科技厅青年基金(批准号: 20130522181JH, 20130522137JH)资助

Immunoassay of Rat Brain Tissue by Surface-enhanced Raman Spectroscopy^†

YANG Jin^1,², LIU Zhuo³, SU Hongyang¹, PENG Ru², SONG Wei¹, ZHAO Bing^1,^*()

1. State Key Laboratory of Supramolecular Structure and Materials, Jilin University, Changchun 130012, China
2. College of Basic Medical Sciences, Jilin University, Changchun 130021, China
3. Department of Vascular Surgery of China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun 130021, China

Received:2015-08-11 Online:2015-11-10 Published:2015-10-26
Contact: ZHAO Bing E-mail:zhaob@jlu.edu.cn
Supported by:
† Supported by the National Natural Science Foundation of China(Nos.21273091, 21221063, 21327803, 21411140235) and the Science and Technology Department Youth Fund of Jilin Province, China(Nos.20130522181JH, 20130522137JH)

摘要/Abstract

摘要：

将常规免疫组织化学法与表面增强拉曼散射光谱(SERS)结合, 建立了一种简便、快速测定大鼠脑组织中神经元特异性骨架蛋白的新方法. 将所制备的SERS免疫胶体金标签加入至大鼠脑组织冰冻切片, 研究了经免疫识别后组织的SERS光谱, 在脑组织切片中得到了探针分子对巯基苯甲酸(MBA)的特征峰(1076, 1589 cm^-1). 对比了不同浓度抗体对SERS信号及免疫组化染色的影响, 结果表明, 与传统的免疫组化法相比, SERS法可以简化步骤, 缩短实验时间, 同时展现出更高的检测灵敏度和选择性.

关键词: 神经丝蛋白200, 表面增强拉曼光谱, 免疫组织化学法

Abstract:

Surface-enhanced Raman scattering(SERS) was used to develop and optimize a novel, quick and simple immunohistochemical ABC(avidin-biotin-HRP complex) assay for detecting specific skeleton protein neurofilament-200(NF-200) in the frozen sections of rat brain tissue. In this study, anti mouse NF-200 labeled colloid gold was used as immunoprobe, which was added into the frozen sections of rat brain tissue containing NF-200 protein. Intense SERS signals of p-mercaptobenzoic acid(MBA) at 1076 and 1589 cm^-1 were observed clearly after the specific binding of antigen and antibody. Meanwhile, the SERS spectra and the immunohistochemical staining effect of antigen and antibody complex with different concentrations of anti NF-200 were examined. Compared with the traditional method, this assay can simplify the procedure, moreover, it showed higher sensitivity and selectivity.

Key words: Neurofilament-200(NF-200), Surface-enhanced Raman scattering(SERS), Immunohisto-chemistry

中图分类号:

O657.37

TrendMD:

杨津, 刘卓, 苏虹羊, 彭茹, 宋薇, 赵冰. 基于SERS的大鼠脑组织免疫分析. 高等学校化学学报, 2015, 36(11): 2317.

YANG Jin, LIU Zhuo, SU Hongyang, PENG Ru, SONG Wei, ZHAO Bing. Immunoassay of Rat Brain Tissue by Surface-enhanced Raman Spectroscopy^†. Chem. J. Chinese Universities, 2015, 36(11): 2317.

图/表 6

Fig.1 TEM image of AuNPs

Fig.2 UV-Vis absorption spectra of AuNPs@Ab-MBA@BSA(a), AuNPs@MBA(b), AuNPs@Ab-MBA(c) and AuNPs(d)

Fig.3 SERS spectra(λex=633 nm)of AuNPs@MBA(a), AuNPs@Ab-MBA(b), AuNPs@Ab-MBA@BSA(c), AuNPs@Ab-MBA@BSA-tissue(d), AuNPs-tissue(e), AuNPs@Ab(f)

Fig.4 Optical images of NF-200 immunoreactivity in mice brain tissue slice(A) and liver tissue slice(B) The nerve cell is labeled in square frame.

Fig.5 SERS spectra(λex=633 nm)of AuNPs@Ab-MBA@BSA-Tissue with different concentrations of anti NF-200 Concentration of anti NF-200/(μg·mL-1): a. 1.000; b. 0.500; c. 0.250; d. 0.125; e. 0.0625.

Fig.6 Optical images of NF-200 immunoreactivity in mice brain tissue slice with different concentrations of anti NF-200

参考文献 27

[1]	Gu L. J., Jian Z. H., Stary C., Xiong X. X., Neurochem. Res., 2015, 40(9), 1786—1791
[2]	Zhao M. L., Zhang L. Z., Wang Z. Y., Wang X. L., Wang Y. Y., Wei H. Y., Li R. H., Du Y. F., Int. Health, 2015, 7(4), 293—297
[3]	Friess S. H., Lapidus J. B., Brody D. L., J. Neurotrauma, 2015, 32(11), 791—800
[4]	Hwang I. K., Koh U. S., Lee J. C., Yoo K. Y., Song J. H., Jung J. Y., Nam Y. S., Lee I. S., Kang T. C., Won M. H., J. Neurol. Sci., 2005, 239(1), 59—66
[5]	Liang W.H., Zhang W.W., Zhao S.F., Li Q. N., Liang H., Ceng R. C., Neurol. Sci.,36(5), 707—712
[6]	Jia Y. J., Wu D., Zhang R. P.,Shuang W. B., Sun J. P., Hao H. H., An Q. J., Liu Q., Neurosci. Lett., 2014, 573, 46—51
[7]	Chen M. H., Liu C., Cai J.Y.,Song X. J., Li X. W., Sun J., Acta Medica Mediterr., 2014, 30(1), 95—99
[8]	Hsu S. M., Raine L., Fanger H., J. Histochem. Cytochem., 1981, 29(4), 577—580
[9]	Zlatian O. M., Comanescu M. V., Rosu A. F., Rosu L., Cruce M., Gaman A. E., Calina C. D., Sfredel V., Rom. J. Morphol. Embryo, 2015, 56(1), 175—181
[10]	Goodpaster T., Randolph H.J., J. Histochem. Cytochem., 2014, 62(3), 197—204
[11]	Garamvoelgyi R., Repa I., Lorincz B., Jakab C., Balka G., Lelovics Z., Magy. Allatorvosok, 2013, 135(9), 535—542
[12]	Endo M., Molohashi A., Akahira J.I., Akagami Y., Minamiya Y., Virchows Arch., 2013, 463(2), 325—335
[13]	Anderson J. J., Fordham S., Overman L., Dignum H., Wood K., Proctor S. J., Crosier S., Angus B., Culpin R. E., Mainou F. T., Int. J. Oncol., 2009, 35(5), 961—971
[14]	Lunedo S. N., Thomaz S. V., Castro E. A., Telles J. E. Q., Acta Histochem., 2012, 114(3), 252—258
[15]	Rivera P. M., Osuna A. K. P., Dominguez A. S., Garza R. G., Int. J. Morphol., 2011, 29(2), 575—580
[16]	Stevenson R., Stokes R. J., MacMillan D., Armstrong D., Faulds K., Wadsworth R., Kunuthur S., Suckling C. J., Graham D., Analyst, 2009, 134(8), 1561—1564
[17]	Zhang B. H., Wang H. S., Lu L. H., Ai K. L., Zhang G., Cheng X. L., Adv. Funct. Mater., 2008, 18(16), 2348—2355
[18]	Chen L., Xue X. X., Cui Y. C., Han X. X., Xu W. Q., Zhao B., Chem. J. Chinese Universities, 2015, 36(8), 1505—1510
	(陈雷, 薛向欣, 崔运成, 韩晓霞, 徐蔚青, 赵冰. 高等学校化学学报, 2015, 36(8), 1505—1510)
[19]	Hering K., Cialla D., Ackermann K., Dörfer T., Möller R., Schneidewind H., Fritzsche W., Popp J., Anal. Bioanal. Chem., 2008, 390, 113—124
[20]	Shanmukh S., Jones L., Zhao Y. P., Driskell J., Tripp R., Dluhy R., Anal. Bioanal. Chem., 2008, 390, 1551—1555
[21]	Yang W., Gooding J. J., Hibbert D. B., J. Electroanal. Chem., 2001, 516, 10—16
[22]	Xu S. P., Ji W. Q., Xu W. Q., Li X. L., Wang L. Y., Bai Y. B., Zhao B., Ozaki Y., Analyst, 2004, 129(1), 63—68
[23]	Lin C. C., Yang Y. M., Chen Y. F., Yang T. S., Chang H. C., Biosens. Bioelectron., 2008, 24(2), 178—183
[24]	Chon H., Lee S., Son S. W., Oh C. H., Choo J. B., Anal. Chem., 2009, 81(8), 3029—3034
[25]	Sun L., Yu C. X., Irudayaraj J., Anal. Chem., 2007, 79(11), 3981—3988
[26]	Dey P. , Olds W., Blakey I., Thurecht K. J., Izake E. L., Fredericks P. M., J. Raman Spectrosc., 2013, 44(12), 1659—1665
[27]	Lee P. C., Meisel D., J. Phys. Chem., 1982, 86, 3391—3395

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[1]	陈嘉敏, 曲孝章, 齐国华, 徐蔚青, 金永东, 徐抒平. SERS纳米探针对电刺激过程中细胞内产生活性氧的检测[J]. 高等学校化学学报, 2022, 43(6): 20220033.
[2]	薛谨, 曹小卫, 刘依帆, 王敏. 纸质空心金纳米笼SERS传感器的制备及对非小细胞肺癌患者痰液中miRNAs的快速高灵敏检测[J]. 高等学校化学学报, 2021, 42(8): 2393.
[3]	陈峰, 程娜, 赵健伟, 宋易恬, 孙燕燕, 娄鑫梨, 童夏燕. 纳米颗粒银层的电沉积机理及SERS效应[J]. 高等学校化学学报, 2021, 42(6): 1891.
[4]	潘菁, 徐敏敏, 袁亚仙, 姚建林. 基于表面增强拉曼光谱快速检测纺织品禁用染料[J]. 高等学校化学学报, 2021, 42(12): 3716.
[5]	李文帅, 武国瑞, 张茜菁, 岳爱琴, 杜维俊, 赵晋忠, 刘定斌. 基于拉曼光谱的细菌检测研究进展[J]. 高等学校化学学报, 2020, 41(5): 872.
[6]	张辉, 张晨杰, 徐敏敏, 袁亚仙, 姚建林. SERS-HPLC联用技术对邻氨基苯硫酚与邻碘苯甲酰氯反应的监测[J]. 高等学校化学学报, 2020, 41(11): 2496.
[7]	韩东来,李博珣,杨硕,闫永胜,杨丽丽,刘洋,李春香. Fe₃O₄@Au核-壳纳米复合材料的制备及对农药福美双的SERS检测研究[J]. 高等学校化学学报, 2019, 40(10): 2067.
[8]	冯微, 王博蔚, 郑艳, 姜洋. 金纳米粒子簇的制备及表面增强拉曼光谱[J]. 高等学校化学学报, 2018, 39(9): 1875.
[9]	张璐涛, 周光明, 罗丹, 陈蓉. 表面增强拉曼光谱快速检测蜂蜜中的金霉素残留[J]. 高等学校化学学报, 2018, 39(8): 1662.
[10]	佟倜, 赵洋洋, 付义林, 单桂晔. 以Au/Cu纳米棒为基底的肺腺癌组织的特征表面增强拉曼光谱研究[J]. 高等学校化学学报, 2017, 38(9): 1536.
[11]	王红梅, 李玲玲, 陈海滨, 曾勇明, 陈宏炬, 陈启振, 林惠真, 田中群, 刘国坤. 表面增强拉曼光谱对西地那非类药物的快速检测[J]. 高等学校化学学报, 2017, 38(6): 1040.
[12]	陈慧, 夏迪, 袁亚仙, 徐敏敏, 姚建林. PDMS-Au复合基底上多环芳烃分子的表面增强拉曼光谱[J]. 高等学校化学学报, 2017, 38(3): 376.
[13]	庞然, 金曦, 赵刘斌, 丁松园, 吴德印, 田中群. 电化学表面增强拉曼光谱的量子化学研究[J]. 高等学校化学学报, 2015, 36(11): 2087.
[14]	杨津, 刘卓, 王晓慧, 隋会敏, 毛竹, 赵冰. 基于WST-8细胞活性实验的表面增强拉曼光谱研究[J]. 高等学校化学学报, 2015, 36(10): 1900.
[15]	杨有铭, 阮伟东, 宋薇, 王旭, 徐蔚青, 赵冰. 表面增强拉曼光谱检测联苯胺[J]. 高等学校化学学报, 2012, 33(10): 2191.

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