Split Intein： a Versatile Tool for Traceless Peptide Segment Ligation

doi:10.7503/cjcu20230188

Abstract

Abstract:

Split intein can efficiently ligate peptide segments via a splicing reaction in a traceless manner and therefore has attracted great attention. Based on the structural characteristics and splicing reaction process of split intein， this paper comprehensively reviewed the recent progresses on the performance optimization and expanded applications of split intein， and revealed its great potential in the field of chemical protein synthesis as an increasingly sophisticated protein engineering technology. Finally， the challenges presented in the split intein- mediated protein trans-splicing and potential solutions in the future research were briefly discussed.

Key words: Split intein, Protein splicing reaction, Site-specific modification, Chemical protein synthesis, Peptide ligation

CLC Number:

O621

TrendMD:

HAN Dongyang, REN Yuxiang, YANG Ziyi, HUANG He, ZHENG Jishen. Split Intein： a Versatile Tool for Traceless Peptide Segment Ligation[J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(10): 20230188.

Figures/Tables 20

References 112

78	Mujika J. I.， Lopez X.， Mulholland A. J.， J. Phys. Chem. B， 2009， 113（16）， 5607—5616
79	Shah N. H.， Eryilmaz E.， Cowburn D.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2013， 135（15）， 5839—5847
80	Shao Y.， Paulus E.， J. Pept. Res.， 2009， 50（3）， 193—198
81	Lockless S. W.， Muir T. W.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 2009， 106（27）， 10999—11004
82	Schwarzer D.， Ludwig C.， Thiel I. V.， Mootz H. D.， Biochem.， 2012， 51（1）， 233—242
83	Stevens A. J.， Brown Z. Z.， Shah N. H.， Sekar G.， Cowburn D.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2016， 138（7）， 2162—2165
84	Appleby⁃Tagoe J. H.， Thiel I. V.， Wang Y.， Wang Y.， Mootz H. D.， Liu X. Q.， J. Biol. Chem.， 2011， 286（39）， 34440—34447
85	Stevens A. J.， Sekar G.， Shah N. H.， Mostafavi A. Z.， Cowburn D.， Muir T. W.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 2017， 114（32）， 8538—8543
86	Beyer H. M.， Mikula K. M.， Li M.， Wlodawer A.， Iwaï H.， FEBS J.， 2020， 287（9）， 1886—1898
87	Pinto F.， Thornton E. L.， Wang B.， Nat. Commun.， 2020， 11（1）， 1529
88	Shi J.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2005， 127（17）， 6198—6206
89	Dawson P. E.， Churchill M. J.， Ghadiri M. R.， Kent S. B. H.， J. Am. Chem. Soc.， 1997， 119（19）， 4325—4329
1	Aebersold R.， Agar J. N.， Amster I. J.， Baker M. S.， Bertozzi C. R.， Boja E. S.， Costello C. E.， Cravatt B. F.， Fenselau C.， Garcia B. A.， Ge Y.， Gunawardena J.， Hendrickson R. C.， Hergenrother P. J.， Huber C. G.， Ivanov A. R.， Jensen O. N.， Jewett M. C.， Kelleher N. L.， Kiessling L. L.， Krogan N. J.， Larsen M. R.， Loo J. A.， Ogorzalek Loo R. R.， Lundberg E.， MacCoss M. J.， Mallick P.， Mootha V. K.， Mrksich M.， Muir T. W.， Patrie S. M.， Pesavento J. J.， Pitteri S. J.， Rodriguez H.， Saghatelian A.， Sandoval W.， Schlüter H.， Sechi S.， Slavoff S. A.， Smith L. M.， Snyder M. P.， Thomas P. M.， Uhlén M.， Van Eyk J. E.， Vidal M.， Walt D. R.， White F. M.， Williams E. R.， Wohlschlager T.， Wysocki V. H.， Yates N. A.， Young N. L.， Zhang B.， Nat. Chem. Biol.， 2018， 14（3）， 206—214
2	Scott C. P.， Abel⁃Santos E.， Wall M.， Wahnon D. C.， Benkovic S. J.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1999， 96（24）， 13638—13643
3	Kent S. B. H.， Chem. Soc. Rev.， 2009， 38（2）， 338—351
4	Oza J. P.， Aerni H. R.， Pirman N. L.， Barber K. W.， Ter Haar C. M.， Rogulina S.， Amrofell M. B.， Isaacs F. J.， Rinehart J.， Jewett M. C.， Nat. Commun.， 2015， 6， 8168
5	Pan M.， Zheng Q.， Gao S.， Qu Q.， Yu Y.， Wu M.， Lan H.， Li Y.， Liu S.， Li J.， Sun D.， Lu L.， Wang T.， Zhang W.， Wang J.， Li Y.， Hu H. G.， Tian C.， Liu L.， CCS Chem.， 2019， 1（5）， 476—489
6	Sui X.， Wang Y.， Du Y. X.， Liang L. J.， Zheng Q.， Li Y. M.， Liu L.， Chem. Sci.， 2020， 11（47）， 12633—12646
7	Zheng Q.， Su Z.， Yu Y.， Liu L.， Curr. Opin. Chem. Biol.， 2022， 70， 102187
8	Zhang B.C.， Li Y. L.， Shi W. W.， Wang T. Y.， Zhang F.， Liu L.， Chem. Res. Chinese Universities， 2020， 36（5）， 733—747
9	Merrifield R. B.， J. Am. Chem. Soc.， 1963， 85（14）， 2149—2154
10	Mijalis A. J.， Thomas D. A.， Simon M. D.， Adamo A.， Beaumont R.， Jensen K. F.， Pentelute B. L.， Nat. Chem. Biol.， 2017， 13（5）， 464—466
11	Ludwig C.， Pfeiff M.， Linne U.， Mootz H. D.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2006， 45（31）， 5218—5221
12	Busche A. E. L.， Aranko A. S.， Talebzadeh⁃Farooji M.， Bernhard F.， Dötsch V.， Iwaï H.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2009， 48（33）， 6128—6131
13	Kurpiers T.， Mootz H. D.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2007， 46（27）， 5234—5237
14	Schnölzer M.， Kent S. B. H.， Science， 1992， 256（5054）， 221—225
90	Li Y. T.， Yi C.， Chen C. C.， Lan H.， Pan M.， Zhang S. J.， Huang Y. C.， Guan C. J.， Li Y. M.， Yu L.， Liu L.， Nat. Commun.， 2017， 8， 14846
91	Li Y.， Heng J.， Sun D.， Zhang B.， Zhang X.， Zheng Y.， Shi W. W.， Wang T. Y.， Li J. Y.， Sun X.， Liu X.， Zheng J. S.， Kobilka B. K.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2021， 143（42）， 17566—17576
92	Ai H.， Chu G. C.， Gong Q.， Tong Z. B.， Deng Z.， Liu X.， Yang F.， Xu Z.， Li J. B.， Tian C.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2022， 144（40）， 18329—18337
93	Appleby J. H.， Zhou K.， Volkmann G.， Liu X. Q.， J. Biol. Chem.， 2009， 284（10）， 6194—6199
94	Aranko A. S.， Züger S.， Buchinger E.， Iwaï H.， PloS One， 2009， 4（4）， e5185
95	Kurpiers T.， Mootz H. D.， ChemBioChem， 2008， 9（14）， 2317—2325
96	Khoo K. K.， Galleano I.， Gasparri F.， Wieneke R.， Harms H.， Poulsen M. H.， Chua H. C.， Wulf M.， Tampé R.， Pless S. A.， Nat. Commun.， 2020， 11（1）， 2284
97	Yagi H.， Tsujimoto T.， Yamazaki T.， Yoshida M.， Akutsu H.， J. Am. Chem. Soc.， 2004， 126（50）， 16632—16638
98	Muona M.， Aranko A. S.， Iwai H.， ChemBioChem.， 2008， 9（18）， 2958—2961
99	Züger S.， Iwai' H.， Nat. Biotechnol.， 2005， 23（6）， 736—740
100	Naumann T. A.， Tavassoli A.， Benkovic S. J.， ChemBioChem， 2008， 9（2）， 194—197
101	Young T. S.， Young D. D.， Ahmad I.， Louis J. M.， Benkovic S. J.， Schultz P. G.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 2011， 108（27）， 11052—11056
102	Kritzer J. A.， Hamamichi S.， McCaffery J. M.， Santagata S.， Naumann T. A.， Caldwell K. A.， Caldwell G. A.， Lindquist S.， Nat. Chem. Biol.， 2009， 5（9）， 655—663
15	Dawson P. E.， Muir T. W.， Clark⁃Lewis I.， Kent S. B.， Science， 1994， 266（5186）， 776—779
16	Shi W. W.， Shi C.， Wang T. Y.， Li Y. L.， Zhou Y. K.， Zhang X. H.， Bierer D.， Zheng J. S.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2022， 144（1）， 349—357
17	Liang L. J.， Chu G. C.， Qu Q.， Zuo C.， Mao J.， Zheng Q.， Chen J.， Meng X.， Jing Y.， Deng H.， Li Y. M.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2021， 60（31）， 17171—17177
18	Pan M.， Gao S.， Zheng Y.， Tan X.， Lan H.， Tan X.， Sun D.， Lu L.， Wang T.， Zheng Q.， Huang Y.， Wang J.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2016， 138（23）， 7429—7435
19	Tang S.， Si Y. Y.， Wang Z. P.， Mei K. R.， Chen X.， Cheng J. Y.， Zheng J. S.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2015， 54（19）， 5713—5717
20	Fang G. M.， Li Y. M.， Shen F.， Huang Y. C.， Li J. B.， Lin Y.， Cui H. K.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2011， 50（33）， 7645—7649
21	Cheng X.， Smith J. C.， Chem. Rev.， 2019， 119（9）， 5849—5880
22	Zheng J. S.， He Y.， Zuo C.， Cai X. Y.， Tang S.， Wang Z. A.， Zhang L. H.， Tian C. L.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2016， 138（10）， 3553—3561
23	Zhang B.， Deng Q.， Zuo C.， Yan B.， Zuo C.， Cao X. X.， Zhu T. F.， Zheng J. S.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2019， 58（35）， 12231—12237
24	Ficht S.， Mattes A.， Seitz O.， J. Am. Chem. Soc.， 2004， 126（32）， 9970—9981
25	Chisholm T. S.， Kulkarni S. S.， Hossain K. R.， Cornelius F.， Clarke R. J.， Payne R. J.， J. Am. Chem. Soc.， 2020， 142（2）， 1090—1100
26	Chu G. C.， Pan M.， Li J.， Liu S.， Zuo C.， Tong Z. B.， Bai J. S.， Gong Q.， Ai H.， Fan J.， Meng X.， Huang Y. C.， Shi J.， Deng H.， Tian C.， Li Y. M.， Liu L.， J. Am. Chem. Soc.， 2019， 141（8）， 3654—3663
27	Zheng Q.， Wang T.， Chu G. C.， Zuo C.， Zhao R.， Sui X.， Ye L.， Yu Y.， Chen J.， Wu X.， Zhang W.， Deng H.， Shi J.， Pan M.， Li Y. M.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2020， 59（32）， 13496—13501
28	Wang T.， Li C.， Wang M.， Zhang J.， Zheng Q.， Liang L.， Chu G.， Tian X.， Deng H.， He W.， Liu L.， Li J.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2022， 61（40）， e202206205
29	Mazmanian S. K.， Liu G.， Ton⁃That H.， Schneewind O.， Science， 1999， 285（5428）， 760—763
30	Wang Z. A.， Whedon S. D.， Wu M.， Wang S.， Brown E. A.， Anmangandla A.， Regan L.， Lee K.， Du J.， Hong J. Y.， Fairall L.， Kay T.， Lin H.， Zhao Y.， Schwabe J. W. R.， Cole P. A.， J. Am. Chem. Soc.， 2022， 144（8）， 3360—3364
31	Podracky C. J.， An C.， DeSousa A.， Dorr B. M.， Walsh D. M.， Liu D. R.， Nat. Chem. Biol.， 2021， 17（3）， 317—325
32	Schmohl L.， Bierlmeier J.， Gerth F.， Freund C.， Schwarzer D.， J. Pept. Sci. Off. Publ. Eur. Pept. Soc.， 2017， 23（7/8）， 631—635
33	Piper I. M.， Struyvenberg S. A.， Valgardson J. D.， Johnson D. A.， Gao M.， Johnston K.， Svendsen J. E.， Kodama H. M.， Hvorecny K. L.， Antos J. M.， Amacher J. F.， J. Biol. Chem.， 2021， 297（2）， 655—660
34	Zuo C.， Ding R.， Wu X.， Wang Y.， Chu G. C.， Liang L. J.， Ai H.， Tong Z. B.， Mao J.， Zheng Q.， Wang T.， Li Z.， Liu L.， Sun D.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2022， 61（28）， e202201887
35	Li Y. M.， Li Y. T.， Pan M.， Kong X. Q.， Huang Y. C.， Hong Z. Y.， Liu L.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2014， 53（8）， 2198—2202
36	Passmore L. A.， Barford D.， Biochem. J.， 2004， 379（3）， 513—525
37	Hodges R. A.， Perler F. B.， Noren C. J.， Jack W. E.， Nucleic Acids Res.， 1992， 20（23）， 6153—6157
38	Davis E. O.， Jenner P. J.， Brooks P. C.， Colston M. J.， Sedgwick S. G.， Cell， 1992， 71（2）， 201—210
39	Pietrokovski S.， Protein Sci.， 1994， 3（12）， 2340—2350
40	Kato I.， Anfinsen C. B.， J. Biol. Chem.， 1969， 244（3）， 1004—1007
41	Southworth M. W.， Adam E.， Panne D.， Byer R.， Kautz R.， Perler F. B.， EMBO J.， 1998， 17（4）， 918—926
42	Mills K. V.， Lew B. M.， Jiang S.， Paulus H.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1998， 95（7）， 3543—3548
43	Dai X.， Xun Q.， Liu X. Q.， Meng Q.， Appl. Microbiol. Biotechnol.， 2015， 99（19）， 8151—8161
44	Wu H.， Xu M. Q.， Liu X. Q.， Biochim. Biophys. Acta， 1998， 1387（1—2）， 422—432
45	Brenzel S.， Kurpiers T.， Mootz H. D.， Biochem.， 2006， 45（6）， 1571—1578
46	Yamazaki T.， Otomo T.， Oda N.， Kyogoku Y.， Uegaki K.， Ito N.， Ishino Y.， Nakamura H.， J. Am. Chem. Soc.， 1998， 120（22）， 5591—5592
47	Otomo T.， Ito N.， Kyogoku Y.， Yamazaki T.， Biochemistry， 1999， 38（49）， 16040—16044
48	Li X.， Zhang X. L.， Cai Y. M.， Zhang L.， Lin Y.， Meng Q.， Int. J. Biol. Macromol.， 2018， 109， 921—931
49	Wu H.， Hu Z.， Liu X. Q.， Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1998， 95（16）， 9226—9231
50	Zettler J.， Schütz V.， Mootz H. D.， FEBS Lett.， 2009， 583（5）， 909—914
51	Iwai H.， Züger S.， Jin J.， Tam P. H.， FEBS Lett.， 2006， 580（7）， 1853—1858
52	Dassa B.， Amitai G.， Caspi J.， Schueler⁃Furman O.， Pietrokovski S.， Biochem.， 2007， 46（1）， 322—330
53	Wei X. Y.， Sakr S.， Li J. H.， Wang L.， Chen W. L.， Zhang C. C.， Res. Microbiol.， 2006， 157（3）， 227—234
54	Matsumura H.， Takahashi H.， Inoue T.， Yamamoto T.， Hashimoto H.， Nishioka M.， Fujiwara S.， Takagi M.， Imanaka T.， Kai Y.， Proteins， 2006， 63（3）， 711—715
55	Choi J. J.， Nam K. H.， Min B.， Kim S. J.， Söll D.， Kwon S. T.， J. Mol. Biol.， 2006， 356（5）， 1093—1106
56	Carvajal⁃Vallejos P.， Pallissé R.， Mootz H. D.， Schmidt S. R.， J. Biol. Chem.， 2012， 287（34）， 28686—28696
57	Neugebauer M.， Böcker J. K.， Matern J. C. J.， Pietrokovski S.， Mootz H. D.， Biol. Chem.， 2017， 398（1）， 57—67
58	Hoffmann S.， Terhorst T. M. E.， Singh R. K.， Kümmel D.， Pietrokovski S.， Mootz H. D.， ChemBioChem， 2021， 22（2）， 364—373
59	Thiel I. V.， Volkmann G.， Pietrokovski S.， Mootz H. D.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2014， 53（5）， 1306—1310
60	Perler F. B.， Nucleic Acids Res.， 2000， 28（1）， 344—345
61	Perler F. B.， Olsen G. J.， Adam E.， Nucleic Acids Res.， 1997， 25（6）， 1087—1093
62	Al⁃Ali H.， Ragan T. J.， Gao X.， Harris T. K.， Bioconjug. Chem.， 2007， 18（4）， 1294—1302
63	Sun W.， Yang J.， Liu X. Q.， J. Biol. Chem.， 2004， 279（34）， 35281—35286
64	Gordo V.， Aparicio D.， Pérez⁃Luque R.， Benito A.， Vilanova M.， Usón I.， Fita I.， Ribó M.， Cell Chem. Biol.， 2018， 25（7）， 871-879.e2
65	Eryilmaz E.， Shah N. H.， Muir T. W.， Cowburn D.， J. Biol. Chem.， 2014， 289（21）， 14506—14511
66	Shah N. H.， Eryilmaz E.， Cowburn D.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2013， 135（49）， 18673—18681
67	Stevens A. J.， Sekar G.， Gramespacher J. A.， Cowburn D.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2018， 140（37）， 11791—11799
68	Zheng Y.， Wu Q.， Wang C.， Xu M.， Liu Y.， Biosci. Rep.， 2012， 32（5）， 433—442
69	Shah N. H.， Vila⁃Perelló M.， Muir T. W.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2011， 50（29）， 6511—6515
70	van Roey P.， Pereira B.， Li Z.， Hiraga K.， Belfort M.， Derbyshire V.， J. Mol. Biol.， 2007， 367（1）， 162—173
71	Du Z.， Zheng Y.， Patterson M.， Liu Y.， Wang C.， J. Am. Chem. Soc.， 2011， 133（26）， 10275—10282
72	Mujika J. I.， Lopez X.， J. Phys. Chem. B， 2017， 121（33）， 7786—7796
73	Friedel K.， Popp M. A.， Matern J. C. J.， Gazdag E. M.， Thiel I. V.， Volkmann G.， Blankenfeldt W.， Mootz H. D.， Chem. Sci.， 2019， 10（1）， 239—251
74	Callahan B. P.， Topilina N. I.， Stanger M. J.， van Roey P.， Belfort M.， Nat. Struct. Mol. Biol.， 2011， 18（5）， 630—633
75	Dearden A. K.， Callahan B.， Roey P. V.， Li Z.， Kumar U.， Belfort M.， Nayak S. K.， Protein Sci.， 2013， 22（5）， 557—563
76	Pereira B.， Shemella P. T.， Amitai G.， Belfort G.， Nayak S. K.， Belfort M.， J. Mol. Biol.， 2011， 406（3）， 430—442
77	Ding Y.， Xu M. Q.， Ghosh I.， Chen X.， Ferrandon S.， Lesage G.， Rao Z.， J. Biol. Chem.， 2003， 278（40）， 39133—39142
103	Horswill A. R.， Savinov S. N.， Benkovic S. J.， Proc. Natl. Acad. Sci.， 2004， 101（44）， 15591—15596
104	Palei S.， Mootz H. D.， Chem. Commun.， 2021， 57（34）， 4194—4197
105	Bionda N.， Fasan R.， ChemBioChem， 2015， 16（14）， 2011—2016
106	Kang D.， Kim D. W.， Kim J. C.， Park H. S.， Angew. Chem. Int. Ed.， 2023， 62（7）， e202214815
107	Mootz H. D.， Muir T. W.， J. Am. Chem. Soc.， 2002， 124（31）， 9044—9045
108	Brenzel S.， Mootz H. D.， J. Am. Chem. Soc.， 2005， 127（12）， 4176—4177
109	Tyszkiewicz A. B.， Muir T. W.， Nat. Methods， 2008， 5（4）， 303—305
110	Selgrade D. F.， Lohmueller J. J.， Lienert F.， Silver P. A.， J. Am. Chem. Soc.， 2013， 135（20）， 7713—7719
111	Vila⁃Perelló M.， Hori Y.， Ribó M.， Muir T. W.， Angew. Chem.， 2008， 120（40）， 7878—7881
112	Böcker J. K.， Dörner W.， Mootz H. D.， Chem. Commun.， 2019， 55（9）， 1287—1290

Host protein	Species	N⁃flanking sequence	C⁃ flanking sequence	Acyl transfer residues	Ref.
DnaB	Rma	LRESG/C	AHN/SIEQDA	CS	［43］
GyrB	Ssp	DSAGG/C	FVHN/SAKQG	CS	［43］
DnaB	Ssp	LRESG/C	VHN/SIEQD	CS	［44］
VMA	Sce	RGTLE/C	VVVHN/CG	CC	［45］
RIR1	Pfu⁃site1	GGG/C	HN/TGL	CT	［46］
RIR1	Pfu⁃site2	TNP/C	SHN/CGEE	CC	［47］
GB⁃D pol1	Psp	GTLEA/SILPEE	LYAHN/SGLNS	SS	［41］
RecA	Mtu	VVVKNK/C	VVVHN/CSPPFK	CC	［42］
DnaE	Ter（TerDnaE⁃3）	TYGVL/C	VVVHN/CYQEQY	CC	［48］

Host protein	Species	N⁃flanking sequence	C⁃ flanking sequence	Acyl transfer residues	Ref.
DnaB	Rma	LRESG/C	AHN/SIEQDA	CS	［43］
GyrB	Ssp	DSAGG/C	FVHN/SAKQG	CS	［43］
DnaB	Ssp	LRESG/C	VHN/SIEQD	CS	［44］
VMA	Sce	RGTLE/C	VVVHN/CG	CC	［45］
RIR1	Pfu⁃site1	GGG/C	HN/TGL	CT	［46］
RIR1	Pfu⁃site2	TNP/C	SHN/CGEE	CC	［47］
GB⁃D pol1	Psp	GTLEA/SILPEE	LYAHN/SGLNS	SS	［41］
RecA	Mtu	VVVKNK/C	VVVHN/CSPPFK	CC	［42］
DnaE	Ter（TerDnaE⁃3）	TYGVL/C	VVVHN/CYQEQY	CC	［48］

Host protein	Species	N⁃flanking sequence	C⁃flanking sequence	Acyl transfer residue	Ref.
DnaE	Ssp	FDQMVKFAEY/C	AN/CFNKSHSTAY	CC	［49］
DnaE	Npu	FEQMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［51］
DnaE	Nsp	FDDMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［52］
DnaE	Asp	FDDMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［53］
DnaE	Oli	FEQMVKFAEY/C	SN/CFNKSHSMAY	CC	［52］
DnaE	Tvu	DFAEY/C	AN/CFNKSHSTAY	CC	［52］
DnaE	Thermococcus kodakarensis KOD1	KILAN/SIL	AHN/SYYGY	SS	［54］
B⁃type DNA polymerase	Neq	EEGFKVIYGD/S	HN/TDSLFISGDK	ST	［55］
NrdJ	（GOS）^*	GTNPC/C	HN/SEIVL	CS	［56］
gp41	（GOS）^*	TRSGY/C	HN/SSSDV	CS	［56］
gp41	（GOS）^*	SQLNR/C	HN/SAVEE	CS	［56］
IMPDH	（GOS）^*	GIGGG/C	HN/SICST	CS	［56］
Vidal T4Lh⁃1		LAS/C	SHN/TNVG	CT	［57］
Vidal UvsX⁃2		ESG/C	SHN/SGK	CS	［16］
NrdHF	（GOS∶AceL） ^a	SIRDE/A	TGN/SMHVE	Class3 ^b CS	［58］
TerL	（GOS∶AceL） ^a	EFE/C	SHN/CEFL	CC	［59］

Host protein	Species	N⁃flanking sequence	C⁃flanking sequence	Acyl transfer residue	Ref.
DnaE	Ssp	FDQMVKFAEY/C	AN/CFNKSHSTAY	CC	［49］
DnaE	Npu	FEQMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［51］
DnaE	Nsp	FDDMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［52］
DnaE	Asp	FDDMLKFAEY/C	SN/CFNKSHSTAY	CC	［53］
DnaE	Oli	FEQMVKFAEY/C	SN/CFNKSHSMAY	CC	［52］
DnaE	Tvu	DFAEY/C	AN/CFNKSHSTAY	CC	［52］
DnaE	Thermococcus kodakarensis KOD1	KILAN/SIL	AHN/SYYGY	SS	［54］
B⁃type DNA polymerase	Neq	EEGFKVIYGD/S	HN/TDSLFISGDK	ST	［55］
NrdJ	（GOS）^*	GTNPC/C	HN/SEIVL	CS	［56］
gp41	（GOS）^*	TRSGY/C	HN/SSSDV	CS	［56］
gp41	（GOS）^*	SQLNR/C	HN/SAVEE	CS	［56］
IMPDH	（GOS）^*	GIGGG/C	HN/SICST	CS	［56］
Vidal T4Lh⁃1		LAS/C	SHN/TNVG	CT	［57］
Vidal UvsX⁃2		ESG/C	SHN/SGK	CS	［16］
NrdHF	（GOS∶AceL） ^a	SIRDE/A	TGN/SMHVE	Class3 ^b CS	［58］
TerL	（GOS∶AceL） ^a	EFE/C	SHN/CEFL	CC	［59］

[1]	WANG Yan, ZHANG Fujun, ZHANG Xiaoyu, XU Jiahui, TONG Bihai, CHEN Ping, KONG Hui. Deep blue organic electroluminescent materials constructed from acenaphthene skeleton [J]. Chem. J. Chinese Universities, 0, (): 20230368.
[2]	WANG Xiaojing, LIU Yixia, LI Yang, YANG Chenzong, FUNG Mankeung, FAN Jian. High-efficiency Near-infrared Thermally Activated Delayed Fluorescence Based on Tetracyano Acceptor [J]. Chem. J. Chinese Universities, 0, (): 20230274.
[3]	YANG Wei, LIU Jiaqi, TANG Cuiman, ZHANG Haonan, WANG Bingbing, SUN Zhong, XU Xiaohui. Copper-catalyzed Synthesis of Amides from Alcohols and Aminopyridines Under Aerobic Conditions [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(8): 20230029.
[4]	LUAN Tian, CUI Sijiao, SUI Lili, SUN Chiyu, ZHANG Dajun. Synthesis and Anti-Toxoplasma Activity of Novel Tetrahydropyrido［4，3-d］pyrimidine Derivatives [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(8): 20230098.
[5]	YAO Yixuan, LU Changbo, ZHANG Hongwei, ZHANG Duxin, SHANG Hongyan, TIAN Yuanyu. Catalytic Performance of ［Fe］ for Regioselective Ring-opening of Epoxides [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(8): 20230137.
[6]	ZHAO Mingxin, YAO Zhigang, LIU Zhongyuan, XU Wenjing, MA Xiaoling, ZHANG Fujun. Research Progress of Layer-by-layer Deposited Organic Solar Cells [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(7): 20230120.
[7]	LIU Junli, YE Cuiping, GUO Meixin, LI Wenying. Influencing Factors and Mechanism of Dehydration Product Formation During Hydroxylmethylation of Fluorene to 9-Fluorenylmethanol [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(6): 20220701.
[8]	WANG Yingjie, PAN Zehui, TAO Zhengyu, WANG Yan, TONG Bihai, FUNG Mankeung, SONG Mingxing. Effect of Intermolecular Interaction on the Properties of Benzophenone-based AIDF Materials [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(4): 20220562.
[9]	ZHANG Jialing, WU Yuanyuan, ZHANG Man, TAO Zhengyu, TIAN Yongpan, ZHANG Qianfeng, TONG Bihai, HE Gufeng, KONG Hui. Dominoes Type Reaction of Spatially Close Diamides and Their Applications in Organic Synthesis [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(2): 20220597.
[10]	LIN Junxu, XI Zhiwei, LI Zhiping, WANG Yingchun. Palladium Catalyzed Selective Synthesis of Pyrrolofuran Derivatives and Carbamates from Propargylic Alcohols and tert⁃Butyl Isonitrile [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2023, 44(2): 20220473.
[11]	LU Meiru, ZHANG Hongyu, SHI Baimei, SUN Maozhong, XU Liguang, XU Chuanlai, KUANG Hua. Chiral Nanomaterials： Bioimaging， Biosensing and Therapeutics [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2022, 43(12): 20220683.
[12]	WEN Zhiguo, QIAO Zaiyin, TIAN Chong, MAXIM Borzov, NIE Wanli. Catalytic Activity and Reaction Mechanism of FLPs for the Reduction of Enamine [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2022, 43(11): 20220555.
[13]	JIN Ruiming, MU Xiaoqing, XU Yan. Bio-chemical Synthesis of Melanin Precursor—— 5，6-Dihydroxyindole（DHI） [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2022, 43(8): 20220134.
[14]	GUO Zhiqiang, YANG Boru, XI Chanjuan. Recent Advances in Reductive Functionalization of Carbon Dioxide with Borohydride Reagents [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2022, 43(7): 20220199.
[15]	ZHANG Zhen, DENG Yu, ZHANG Qinfang, YU Dagang. Visible Light-driven Carboxylation with CO₂ [J]. Chem. J. Chinese Universities, 2022, 43(7): 20220255.