鹰嘴豆β-半乳糖苷酶的研究──催化水解ONPG酶促反应动力学及其活性位的化学修饰

高等学校化学学报 ›› 1996, Vol. 17 ›› Issue (10): 1555.

鹰嘴豆β-半乳糖苷酶的研究──催化水解ONPG酶促反应动力学及其活性位的化学修饰

李绪渊¹, 赵克浩¹, 孟延发², 马建泰¹

1. 兰州大学化学系, 兰州, 730000;
2. 兰州大学生物系, 兰州, 730000

收稿日期:1995-11-21 出版日期:1996-10-24 发布日期:1996-10-24
通讯作者: 李绪渊,男,57岁,副教授.
作者简介:李绪渊,男,57岁,副教授.
基金资助:
国家自然科学基金

Studies on the β-Galactosidase from Gram──Gatalytic Reaction Kinetics of ONPG Hydrolysis and the Chemical Modification of Activity Sites

LI Xu-Yuan¹, ZHAO Ke-Hao¹, MEN Yan-Fa², MA Jian-Tai¹

1. Department of Chemistry, Lanzhou University, Lanzhou, 730000;
2. Department of Biology, Lanzhou University, Lanzhou, 730000

Received:1995-11-21 Online:1996-10-24 Published:1996-10-24

摘要/Abstract

摘要： 研究了鹰嘴豆发芽种子的β-半乳糖苷酶Ⅰ和β-半乳糖苷酶Ⅱ在催化水解邻硝基苯酚-β-D-半乳糖苷酶促反应中的催化性质和反应动力学,求得不同反应温度的米氏常数K_M、最大反应速率r_m和反应活化能E_a等动力学参数,并以各种特征化学修饰剂对β-半乳糖苷酶Ⅰ中的活性基团进行了化学修饰。关联修饰情况与酶活性的关系,推知β-半乳糖苷酶Ⅰ中有色氨酸和巯基存在。它们是酶活性中心的组成基团,而该活性中心至少含有1个色氨酸和2个巯基,探讨了酶的活性位及其催化作用机理。

关键词: &beta, -半乳糖苷酶, 鹰嘴豆, 化学修饰, 催化水解, 反应动力学

Abstract: The catalytic properties of β-galactosidaseⅠand Ⅱpurified from gram germination seeds as ONPGhydrolysis catalysts were investigated.According to the Michaelis Menten mechanism of enzyme catalytic reaction,the kinetic parameters K_M,r_m and E_a of catalytic hydrolysis reaction of ONPG were measured.By using of various chemical dressing reagents for enzyme,we studied the function groups of β-galactosidaseⅠ.The relationship between the function groups and catalytic activity of enzyme revealed that hydrosulphonyl and tryptophan existed in β-galactosidase Ⅰand they were the composition groups in the active site of β-galactosidaseⅠfor the catalytic hydrolysis reaction of ONPG.

Key words: Galactosidase, Gram, Chemical modification, Catalytic hydrolysis, Reaction kinetics

TrendMD:

李绪渊, 赵克浩, 孟延发, 马建泰. 鹰嘴豆β-半乳糖苷酶的研究──催化水解ONPG酶促反应动力学及其活性位的化学修饰. 高等学校化学学报, 1996, 17(10): 1555.

LI Xu-Yuan, ZHAO Ke-Hao, MEN Yan-Fa, MA Jian-Tai. Studies on the β-Galactosidase from Gram──Gatalytic Reaction Kinetics of ONPG Hydrolysis and the Chemical Modification of Activity Sites. Chem. J. Chinese Universities, 1996, 17(10): 1555.

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