高等学校化学学报 ›› 2013, Vol. 34 ›› Issue (5): 1121.doi: 10.7503/cjcu20120772
陈晨1,2, 史倩1, 陈军辉1, 张茹潭1, 李鑫1, 郑立1, 王小如1,3
CHEN Chen1,2, SHI Qian1, CHEN Jun-Hui1, ZHANG Ru-Tan1, LI Xin1, ZHENG Li1, WANG Xiao-Ru1,3
摘要:
以可重复使用的固定化酶代替游离态酶, 建立一种基于比色分析的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂体外筛选新模型. 采用以氨基化硅胶为载体固定的AChE优化了实验条件, 用AChE抑制剂阳性对照物他克林和毒扁豆碱对该模型进行验证, 还对模型技术参数进行评价, 并将新模型用于单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制活性评价. 结果表明, 最佳实验条件为: 固定化酶用量55 μL, 底物浓度5 mmol/L, 甲醇、 乙醇及体积分数不高于6%的二甲基亚砜水溶液均可作为样品溶剂; 模型验证及模型技术参数评价结果良好, 该模型对AChE抑制剂筛选有较好的特异性和灵敏度, 可用于筛选AChE抑制剂. 该模型具有适用性强、 固定化酶可重复使用及结果可靠等优点, 是单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制剂活性评价的有效方法.
中图分类号:
TrendMD: