一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征

高等学校化学学报 ›› 2002, Vol. 23 ›› Issue (2): 203.

一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征

赵莹歆, 上官棣华, 赵睿, 刘国诠

中国科学院化学研究所, 分子科学中心, 北京 100080

收稿日期:2001-02-19 出版日期:2002-02-24 发布日期:2002-02-24
通讯作者: 赵睿(1962年出生),女,副研究员,主要从事生化分析研究.
基金资助:
国家自然科学基金(批准号:20035010;20075033);中国科学院重大基础研究及物质基地项目资助

Preparation and Characteristics of High Performance Affinity Chromatography Medium Used for the Separation of Antithrombin Ⅲ

ZHAO Ying-Xin, SHANGGUAN Di-Hua, ZHAO Rui, LIU Guo-Quan

Center for Molecular Science, Institute of Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China

Received:2001-02-19 Online:2002-02-24 Published:2002-02-24

摘要/Abstract

摘要： 以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球(PGMA)为基质,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料,该填料对抗凝血酶的亲和容量为1.2mg/g,对抗凝血酶和人血清白蛋白的回收率分别为96.9%和94.4%.利用前沿色谱法测定了肝素与抗凝血酶之间的表观解离常数为1.96×10^-5mol/L.利用该填料可直接从人血浆中分离出抗凝血酶.

关键词: 高效亲和色谱, 肝素, 抗凝血酶

Abstract: A high performance affinity chromatography medium used for separation of antithrombin Ⅲ was prepared. Monodisperse poly(glycidyl methacrylate) beads(PGMA) were employed as the affinity support. Heparin was linked covalently to amino-PGMA-beads, which was prepared by amination of PG-MA. The resultant affinity media present a minimal non specific interaction with proteins and the protein recovery was 96.9% and 94.4% for antithrombin Ⅲ and human serum albumin, respectively. Its affinity capacity for antithrombin Ⅲ was 12 mg/g beads. The apparent dissociation constant between antithrombin Ⅲ and immobilized heparin was 1.96×10^-5 mol/Lwhich was evaluated by front chromatography. The affinity medium was used to separate antithrombin Ⅲ from human plasma.

Key words: High performance affinity chromatography, Heparin, Antithrombin Ⅲ

中图分类号:

O657

TrendMD:

赵莹歆, 上官棣华, 赵睿, 刘国诠. 一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征. 高等学校化学学报, 2002, 23(2): 203.

ZHAO Ying-Xin, SHANGGUAN Di-Hua, ZHAO Rui, LIU Guo-Quan . Preparation and Characteristics of High Performance Affinity Chromatography Medium Used for the Separation of Antithrombin Ⅲ. Chem. J. Chinese Universities, 2002, 23(2): 203.

[1]	梁群焘, 邹强, 林江慧, 刘树滔, 魏峥. 肝素非还原端饱和结构的紫外吸收研究及在肝素寡糖测序中的应用[J]. 高等学校化学学报, 2021, 42(6): 1776.
[2]	徐娜, 刘众虎, 兰承武, 尹建行, 程凯旋, 孟磊. 官能化反蛋白石结构光子晶体的构筑及对肝素的检测[J]. 高等学校化学学报, 2019, 40(9): 1932.
[3]	张晓, 单鑫迪, 赵小亮, 李国云, 王小江, 蔡超, 郝杰杰, 于广利. 低抗凝肝素寡糖的制备、结构表征及免疫活性评价[J]. 高等学校化学学报, 2016, 37(7): 1335.
[4]	刘继华, A.Carver John, C. Thorn David. β-酪蛋白淀粉样纤维沉淀的形成及影响因素[J]. 高等学校化学学报, 2014, 35(5): 976.
[5]	尹建元, John A. Carver, David C. Thorn, 刘继华. 磷脂和硫酸肝素对α_s1-酪蛋白淀粉样纤维沉淀形成的影响[J]. 高等学校化学学报, 2013, 34(8): 1894.
[6]	谢槟, 李贵才, 代璐, 杨苹, 黄楠. 基于多巴胺自聚合及肝素固定改善钛的血液相容性[J]. 高等学校化学学报, 2012, 33(01): 90.
[7]	赵峡, 李广生, 于广利, 王金霞, 王皓, 孙淑萌, 郑晨. 问题肝素中多硫酸软骨素杂质的柱前衍生高效液相色谱分析[J]. 高等学校化学学报, 2010, 31(3): 479.
[8]	耿雪1, 叶霖1, 陈兵2, 王培境1, 张爱英1, 张建2, 冯增国1. 具有抗凝性能的肝素化ε-己内酯/L-丙交酯共聚酯的合成及电纺丝加工[J]. 高等学校化学学报, 2010, 31(1): 205.
[9]	彭采宇, 仝维鋆, 韩宝三, 王兆海, 高长有, 沈家骢. 不同表面性质聚电解质多层膜的制备及蛋白质吸附和血液相容性能[J]. 高等学校化学学报, 2009, 30(11): 2311.
[10]	侯悦, 林全愧, 计剑, 沈家骢. 交联结构对肝素/壳聚糖层层组装多层膜内皮细胞相容性的影响[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(9): 1890.
[11]	曲和之, 杜姗姗, 郝东云, 张雷, 黄露, 王晓平. 人CuZn-SOD的分子改造及在毕赤酵母中的表达[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(7): 1390.
[12]	孙自才, 魏峥, 魏可镁. 高密度自由醛基聚合物粉体材料的制备与应用[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(11): 2218.
[13]	魏民周义发田美红陈琳曾宪录. 高碘酸氧化肝素抑制P-选择素介导的A375细胞粘附[J]. 高等学校化学学报, 2006, 27(2): 236.
[14]	张红武, 赵睿, 陈志勇, 上官棣华, 刘国诠. 以石英晶体微天平-流动注射系统动态测定生物分子相互作用[J]. 高等学校化学学报, 2004, 25(S1): 159.
[15]	阎作伟, 胡远东, 李松, 江涛. 肝素与HIV-1膜表面蛋白gp120相互作用的预测和模拟[J]. 高等学校化学学报, 2004, 25(3): 522.