高等学校化学学报 ›› 2019, Vol. 40 ›› Issue (12): 2512.doi: 10.7503/cjcu20190444
收稿日期:
2019-08-07
出版日期:
2019-12-04
发布日期:
2019-12-04
通讯作者:
孙仕勇
E-mail:shysun@swust.edu.cn
基金资助:
Xiaoyu FAN,Ke WANG,Shiyong SUN(),Biaobiao MA,Rui LÜ
Received:
2019-08-07
Online:
2019-12-04
Published:
2019-12-04
Contact:
Shiyong SUN
E-mail:shysun@swust.edu.cn
Supported by:
摘要:
以铁氨基黏土(Fe-aminoclay)为载体, 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)为共价交联剂, 构筑了铁氨基黏土纳米结构脂肪酶催化剂(Feclay-lipase). 利用X射线衍射(XRD)、 透射电子显微镜(TEM)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)等技术对Feclay-lipase进行了表征, 并通过酶动力学对比研究了游离脂肪酶和Feclay-lipase的酶学特性. 结果表明, Fe-aminoclay的载酶量为414.4 mg/g, 固定化效率可达82.88%, Feclay-lipase的酶活较游离酶提高了3倍, 最适反应温度提高了10 ℃, 最适反应 pH向碱性偏移, 储存稳定性更好, 在4 ℃下贮存30 d后其酶活无明显减弱.
中图分类号:
TrendMD:
范小雨,王可,孙仕勇,马彪彪,吕瑞. 铁氨基黏土纳米结构脂肪酶的构筑及催化特性. 高等学校化学学报, 2019, 40(12): 2512.
Xiaoyu FAN,Ke WANG,Shiyong SUN,Biaobiao MA,Rui LÜ. Construction and Catalytic Performances of Fe-aminoclay Nanostructured Lipase †. Chem. J. Chinese Universities, 2019, 40(12): 2512.
Fig.1 XRD patterns(A) and FTIR spectra(B) of Fe-aminoclay and Feclay-lipase with various lipase loadings (A) a. Fe-aminoclay; b. Feclay-10lipase; c. Feclay-50lipase; d. Feclay-100lipase; e. Feclay-150lipase; f. Feclay-200lipase. (B) a. Fe-aminoclay; b. lipase; c. Feclay-10lipase; d. Feclay-50lipase; e. Feclay-100lipase; f. Feclay-150lipase; g. Feclay-200lipase.
Fig.3 Zeta potentials(A) and average particle sizes(B) of Fe-aminoclay, lipase and Feclay-lipase a. Fe-aminoclay; b. lipase; c. Feclay-10lipase; d. Feclay-50lipase; e. Feclay-100lipase; f. Feclay-150lipase; g. Feclay-200lipase.
Fig.5 TEM images of Fe-aminoclay(A) and Feclay-lipase(B), SEM images of Fe-aminoclay(C), Feclay-150lipase(D) and the selected area in (D) image(E) and contact angle images of Fe-aminoclay(F), lipase(G) and Feclay-150lipase(H)
Fig.9 Lineweaver-Burk plots of the free lipase and Feclay-lipase(A), absorbance at the peak position for p-NP(410 nm) as a function of time for two different catalytic systems(B)
Sample | R2 | Km/mmol | Vmax/(mmol·mL-1·min -1) |
---|---|---|---|
Free lipase | 0.997 | 5.35 | 99 |
Feclay-50lipase | 0.996 | 6.98 | 217.39 |
Feclay-150lipase | 0.996 | 7.84 | 175.42 |
Table 1 Kinetic parameters of the free and the Feclay-lipase
Sample | R2 | Km/mmol | Vmax/(mmol·mL-1·min -1) |
---|---|---|---|
Free lipase | 0.997 | 5.35 | 99 |
Feclay-50lipase | 0.996 | 6.98 | 217.39 |
Feclay-150lipase | 0.996 | 7.84 | 175.42 |
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