FITC标记重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)在NB4细胞中的动态定位

高等学校化学学报

FITC标记重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)在NB4细胞中的动态定位

梁重阳¹, 徐蔚青², 曹焱鑫², 刘立侠³, 张淑芹¹, 刘志屹¹, 李泓睿¹, 李柏志¹, 孙非¹

1. 吉林大学再生医学科学研究所, 长春 130021;
2. 吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室, 长春 130012;
3. 东北师范大学生命科学学院, 长春 130024

收稿日期:2008-07-21 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-03-10 发布日期:2009-03-10
通讯作者: 孙非

Dynamic Observation of Cellular Localization of Fluorescein Isothiocyanate Labeled Recombinant Ganoderma Lucidum Immunoregulatory Protein(rLz-8) in NB4 APL Cell

LIANG Chong-Yang¹, XU Wei-Qing², CAO Yan-Xin², LIU Li-Xia³, ZHANG Shu-Qin¹, LIU Zhi-Yi¹, LI Hong-Rui¹, LI Bai-Zhi¹, SUN Fei^1*

1. Institute of Frontier Medical Science, Jilin University, Changchun 130021, China;
2. State Key Lab for Supramolecular Structure and Materials, Jilin University, Changchun 130012, China;
3. School of Life Sciences, Northeast Normal University, Changchun 130024, China

Received:2008-07-21 Revised:1900-01-01 Online:2009-03-10 Published:2009-03-10
Contact: SUN Fei

摘要/Abstract

摘要： 实验发现, 重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)可直接杀伤人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4. 利用异硫氰酸荧光素(FITC)标记rLz-8, 其相关的活性实验结果和晶体结构分析都表明, FITC没有影响rLz-8已知生物学功能. 通过激光共聚焦显微镜观察FITC-rLz-8在NB4细胞内的动态过程发现, FITC-rLz-8可识别细胞膜上的受体, 并可进入细胞质, 并最终富集在细胞核区域内. Annexin V-FITC双染检测结果显示, rLz-8对NB4细胞杀伤作用的可能机制是对NB4细胞凋亡的诱导作用, 在一定浓度范围内, 剂量与凋亡诱导率成正相关. 因此rLz-8能够诱导肿瘤细胞NB4发生凋亡的亚细胞学机制可定位在细胞核上.

关键词: 异硫氰酸荧光素(FITC), 亚细胞定位, 细胞核, 凋亡, NB4细胞

Abstract: NB4 APL cell was induced apoptosis by Recombinant Ganoderma lucidum immunoregulatory protein(rLz-8) for the first time in this study. The dynamic cellular localization of FITC-rLz-8 was observed by laser scanning confocal microscope LSCM: identifying the receptors of cell membrane, entering into cell, gathering on nucleus finally. Annexin V-FITC kit was used for measuring apoptosis of NB4 by rLz-8. Results show that the effects of the dose group(0.5 μg/mL) is close to the one of positive control(As₂O₃). All data show that apoptosis inducing activity of rLz-8 in HL60 cells and changes of cell morphology and Ca²⁺ level in cytosol are probably interrelate with rLz-8's subcellular localization.

Key words: Fluorescein isothiocyanate(FITC), Subcellular localization, Nucleus, Apoptosis, NB4 cell

中图分类号:

TrendMD:

梁重阳,徐蔚青,曹焱鑫,刘立侠,张淑芹,刘志屹,李泓睿,李柏志,孙非 . FITC标记重组灵芝免疫调节蛋白(rLz-8)在NB4细胞中的动态定位. 高等学校化学学报, doi: .

LIANG Chong-Yang¹, XU Wei-Qing², CAO Yan-Xin², LIU Li-Xia³, ZHANG Shu-Qin¹, LIU Zhi-Yi¹, LI Hong-Rui¹, LI Bai-Zhi¹, SUN Fei^1*
. Dynamic Observation of Cellular Localization of Fluorescein Isothiocyanate Labeled Recombinant Ganoderma Lucidum Immunoregulatory Protein(rLz-8) in NB4 APL Cell. Chem. J. Chinese Universities, doi: .

[1]	袁嘉怿, 叶宝彤, 吴婧, 李颖, 陈敬华, 陈荆晓. 硫酸化糖修饰Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子诱导肿瘤细胞凋亡研究[J]. 高等学校化学学报, 2018, 39(11): 2458.
[2]	张金亮, 马鑫, 徐梦溪, 宗铖, 任斌. 快速线扫描拉曼成像技术在研究CaSki细胞凋亡过程中的应用[J]. 高等学校化学学报, 2016, 37(7): 1257.
[3]	丁国斌, 李彬春, 郭轶, 徐力. 10-羟基喜树碱的光谱性质、抗肿瘤活性及应用于细胞标记研究[J]. 高等学校化学学报, 2014, 35(11): 2324.
[4]	朱志杰, 刘琼, 陈平, 续旭, 倪嘉缵, 杨思林, 宋云. 硒化聚甘露糖醛酸的合成及抗阿尔茨海默症细胞氧化与凋亡[J]. 高等学校化学学报, 2013, 34(1): 115.
[5]	黄晓纯, 郑军生, 陈填烽, 张逸波, 罗懿, 郑文杰. 1,2,5-硒二唑嘧啶衍生物ASPO的合成及抗氧化与抗肿瘤活性[J]. 高等学校化学学报, 2012, 33(05): 976.
[6]	范颖姚静周建平. 细胞核靶向聚乙烯亚胺-地塞米松偶联物的制备及作为基因载体的应用[J]. 高等学校化学学报, 2011, 32(12): 2916.
[7]	张元红, 孙渝明, 刘鑫, 赵宁,于晓强, 黄柏标. 双阳离子咔唑衍生物与DNA相互作用的光谱研究[J]. 高等学校化学学报, 2010, 31(9): 1860.
[8]	石渊渊, 李志强, 谷敬丽, 王玉兰. 神经鞘磷脂合成酶基因沉默对细胞凋亡的影响[J]. 高等学校化学学报, 2009, 30(9): 1759.
[9]	李霄, 金宁一, 李昌, 田明尧, 陈漉,贾鹏, 刘立明,刘妍,高鹏,. 抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析[J]. 高等学校化学学报, 2009, 30(4): 682.
[10]	赵文静, 牛凤兰. 3,4,5-三羟基苯甲酸通过线粒体途径诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡[J]. 高等学校化学学报, 2009, 30(2): 320.
[11]	黄河宁,李程,谢笠升,黄河清, . 茶多酚锰-壳聚糖微球的制备、控释和诱导肝癌细胞凋亡的研究[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(8): 1592.
[12]	王占峰,罗毅男,郑勇辉,韩海玲,洪新雨,景遐斌 . 键合紫杉醇的纳米胶束与C₆胶质瘤细胞的相互作用[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(8): 1671.
[13]	邢雁霞,苏爱,杜卫,王春波 . 扇贝多肽经由aSMase-JNK通路抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(4): 757.
[14]	唐宏武,SMITH D. A. . 乙二醛诱导细胞凋亡的近红外表面增强拉曼光谱[J]. 高等学校化学学报, 2008, 29(2): 254.
[15]	黄河宁,,李安章,翁露娜,林庆梅,黄河清,郑忠辉,李棋福,蔡宗苇 . 茶多酚锰合成、表征及络合和诱导肿瘤细胞凋亡的研究[J]. 高等学校化学学报, 2007, 28(6): 1072.