双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测

高等学校化学学报 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (2): 274.

双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测

郭秋平, 羊小海, 王柯敏, 孟祥贤, 李军, 仲志鸿

湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室, 化学化工学院, 生物医学工程中心, 生命科学与技术研究院, 生物纳米与分子工程湖南省重点实验室, 长沙 410082

收稿日期:2009-06-08 出版日期:2010-02-10 发布日期:2010-02-10
通讯作者: 王柯敏, 男, 博士, 教授, 博士生导师, 主要从事纳米及分子水平上的生物分析化学及纳米生物技术研究. E-mail: kmwang@hnu.cn
基金资助:
国家“九七三”计划项目(批准号: 2002CB513110)、科技部国际合作重点项目(批准号: 2003DF000039)、国家自然科学基金(批准号: 90606003, 20805012)和湖南省杰出青年科学基金(批准号: 08JJ1002)资助.

Simple Method of Protein Detection Based on Double-stranded Fluorescent Aptamer Probe

GUO Qiu-Ping, YANG Xiao-Hai, WANG Ke-Min*, MENG Xiang-Xian, LI Jun, ZHONG Zhi-Hong

State Key of Laboratory of Chemo/biosensing and Chemomertrics, College of Chemistry and Chemical Engineering, Biomedical Engineering Center, Institute of Biological Technology, Key Laboratory for Bio-Nanotechnology and Molecule Engineering of Hunan Province, Hunan University, Changsha 410082, China

Received:2009-06-08 Online:2010-02-10 Published:2010-02-10
Contact: WANG Ke-Min. E-mail: kmwang@hnu.cn
Supported by:
国家“九七三”计划项目(批准号: 2002CB513110)、科技部国际合作重点项目(批准号: 2003DF000039)、国家自然科学基金(批准号: 90606003, 20805012)和湖南省杰出青年科学基金(批准号: 08JJ1002)资助.

摘要/Abstract

摘要：

发展了一种基于双链荧光核酸适体(F-Aptamer)探针的简单快速检测蛋白质的分析方法. 该双链荧光Aptamer探针由一条带荧光标记的Aptamer探针和带猝灭标记的互补DNA组成, 当靶蛋白存在时, 能形成比双链荧光Aptamer探针更稳定的F-Aptamer/蛋白质复合物, 并发出荧光, 从而实现对蛋白质的简便快速检测, 检测线性范围为6~100 nmol/L, 检出限为6 nmol/L. 该方法设计简单, 对核酸适体分子的大小和空间结构没有要求, 可作为一种通用的基于F-Aptamer识别机理的蛋白质检测方法.

关键词: 核酸适体; 蛋白质检测; 凝血酶

Abstract:

A simple method of protein detection was developed using a double-stranded fluorescent aptamer probe. This double-stranded aptamer probe consisted of an aptamer probe labeled with a fluorophore and a short complementary oligonucleotide labeled with a quencher. In the presence of protein, the double-stranded aptamer probe dissociated and F-aptamer/protein complex was formed, leading to fluorescence restoring. Then protein detection was carried out by monitoring fluorescence enhancement, with a liner range of 6—100 nmol/L and detection limit of 6 nmol/L. This design strategy is easy to generalize for any aptamer without prior knowledge of its secondary or tertiary structure, and would be used as a simple and general tool for protein detection.

Key words: Aptamer; Protein detection; Thrombin

TrendMD:

郭秋平, 羊小海, 王柯敏, 孟祥贤, 李军, 仲志鸿. 双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测. 高等学校化学学报, 2010, 31(2): 274.

GUO Qiu-Ping, YANG Xiao-Hai, WANG Ke-Min*, MENG Xiang-Xian, LI Jun, ZHONG Zhi-Ho. Simple Method of Protein Detection Based on Double-stranded Fluorescent Aptamer Probe. Chem. J. Chinese Universities, 2010, 31(2): 274.