高等学校化学学报 ›› 2006, Vol. 27 ›› Issue (4): 641.
赵超1, 李连之1,2, 冀海伟1, 王莉1, 许涛1, 刘金凤1
ZHAO Chao1, LI Lian-Zhi 1,2* , JI Hai-Wei1, WANG Li1, XU Tao1, LIU Jin-Feng1
摘要:
构建了神经红蛋白F28Y, F106Y的两种突变体, 并进行了表达、 纯化和谱学表征. 电喷雾质谱表明突变体蛋白的分子量与理论值一致. 氧化型和还原型F28Y及F106Y的紫外可见吸收光谱与野生型相似, 仅氧化型F28Y的Soret 带有2 nm的蓝移, 说明这两种突变体蛋白仍保持六配位形式. F28Y的荧光最大发射峰明显红移(340 nm→347 nm), 表明其荧光基团更加暴露于极性环境中. 圆二色光谱表明, 突变体蛋白的α螺旋含量降低且F28Y产生了β折叠, 这是由于F28相对于F106则位于疏水腔外部且更加接近于溶剂表面所致. 热稳定性顺序为NGB>F28Y>F106Y, F106Y最不稳定, 是因为其与血红素间存在着较强的疏水作用, 突变使F106与血红素间的作用力减弱, 从而导致血红素在热变性条件下更容易从蛋白中解离出来.
中图分类号:
TrendMD: