高等学校化学学报 ›› 2012, Vol. 33 ›› Issue (11): 2481.doi: 10.7503/cjcu20120368
李霄1,2, 屈勇刚2,3, 贾鹏2,4, 刘立明2,5, 季慧范1,2, 赫东芸1,2, 金宁一2, 迟宝荣1
LI Xiao1,2, QU Yong-Gang2,3, JIA Peng2,4, LIU Li-Ming2,5, JI Hui-Fan1,2, HE Dong-Yun1,2, JIN Ning-Yi2, CHI Bao-Rong1
摘要:
戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的肠道病毒性传染病. HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒, 其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成, 属戊型肝炎病毒科. HEV衣壳蛋白由ORF2编码. 本研究根据编码HEV ORF2 aa382~aa674的核苷酸序列克隆了p293基因, 并将其克隆入原核表达载体pET28a, 利用大肠杆菌BL21(DE3)对HEV衣壳蛋白截短体(p293)进行了表达. SDS-PAGE和Western blot检测结果表明, 在优化的表达条件下(1 mmol/L IPTG, 250 r/min, 37℃, 5 h), 重组蛋白p293能够在大肠杆菌内有效表达, 目的蛋白约占总蛋白的66.15%. TEM检测结果显示, 原核表达的p293能够在体外形成约30~40 nm的病毒样颗粒. 免疫印迹和免疫荧光检测结果表明, p293与HEV标准阳性血清具有良好的反应原性和反应特异性. 实验结果表明, p293可应用于HEV宿主吸附和病毒装配研究, 为HEV的预防与诊断研究奠定了基础.
中图分类号:
TrendMD: