高等学校化学学报 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (10): 2274.
周丽霞1,2,4,何定庚2,3,4,何晓晓1,2,4,石慧2,3,4,王柯敏1,2,3,4,曹杰2,3,4
ZHOU Li-Xia1,2,4, HE Ding-Geng2,3,4, HE Xiao-Xiao1,2,4*, SHI Hui2,3,4, WANG Ke-Min1,2,3,4*, CAO Jie2,3,4
摘要: 将免疫荧光纳米标记技术与激光共聚焦显微成像方法相结合, 发展了一种基于二氧化硅荧光纳米颗粒和核酸染料SYBR Green Ⅰ的双色显微成像技术用于大肠杆菌O157∶H7的检测. 采用联吡啶钌(RuBpy)二氧化硅荧光纳米颗粒对羊抗大肠杆菌O157∶H7抗体进行修饰, 基于抗体\|抗原相互作用实现了其对目标大肠杆菌O157∶H7的特异性标记; 同时以核酸染料SYBR Green Ⅰ对细菌进行染色, 将细菌和纳米颗粒团聚体区分开, 实现了对大肠杆菌O157∶H7的双色标记, 并通过激光共聚焦显微镜进行免分离的荧光成像检测. 结果表明, 该方法可用于缓冲溶液体系和混合细菌样品中目标大肠杆菌O157∶H7的特异性检测, 在仅含5%目标菌的混合样品中仍能观察到具有明显黄色荧光的大肠杆菌O157∶H7, 且整个检测步骤包括样品预处理可在3 h内完成. 该方法则具有较好的灵敏度, 可检出2.6×103 Cell/mL的目标细菌样品. 若采用针对其它病原菌细胞壁抗原的特异性抗体, 则有望发展成为一种通用技术用于多种病原菌的快速和灵敏检测.
中图分类号:
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