Chemical Enzymatic Analysis of Temporal Alterations in Mitochondrial Protein O-GlcNAc Modification during the Therapeutic Senescence Process of Breast Cancer Cells

doi:10.7503/cjcu20250121

Abstract

Abstract:

Cellular premature senescence is closely related to mitochondrial dysfunction. In this study， doxorubicin was used to induce breast cancer cells MCF-7 to establish a model of therapeutic premature senescence cells. The chemical enzymatic method based on GalT1 enzyme（Y289L） was employed to label the mitochondrial O-GlcNAc glycoproteome of MCF-7 cells at multiple time points during the premature senescence process. Click chemistry reaction was utilized to orthogonally capture mitochondrial glycoproteins. Label-free quantitative proteomics analysis was carried out through LC-MS/MS to investigate the temporal quantitative changes of mitochondrial O-GlcNAc glycoproteins during the cellular premature senescence process. Moreover， the biological function enrichment analysis was conducted to identify mitochondrial O-GlcNAc modified proteins involved in the regulation of premature senescence of breast cancer cells， and to elucidate the mechanism by which mitochondrial O-GlcNAc glycosylation regulates cellular premature senescence.

Key words: Chemoenzymatic labelling method, Cell senescence, O-GlcNAcylation, Proteomics

CLC Number:

O657.6

TrendMD:

JIANG Xinya, MA Qile, CHENG Hongying, LIU Yin, HUANG Huang, ZHAO Ran, LIU Yubo, ZHONG Xiaomin. Chemical Enzymatic Analysis of Temporal Alterations in Mitochondrial Protein O-GlcNAc Modification during the Therapeutic Senescence Process of Breast Cancer Cells[J]. Chem. J. Chinese Universities, 2025, 46(10): 20250121.

Figures/Tables 5

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