%0 Journal Article %A 武瑶 %A 梁雯婧 %A 李成 %A 商旭 %A 丛丽娜 %T 热处理对海参溶菌酶C端多肽的抑菌活性和结构的影响 %D 2014 %R 10.7503/cjcu20131144 %J 高等学校化学学报 %P 1044-1050 %V 35 %N 5 %X

实验优化了重组蛋白C端多肽(SjLys-C)的E. coli Rosetta(DE3)pLysS表达系统, 将重组质粒pET-32a(+)-SjLys-C转入有助于蛋白二硫键正确折叠的新表达宿主E. Coli Rosetta-GamiB(DE3)pLysS中. SDS-PAGE分析表明, 重组蛋白SjLys-C在宿主中得到高效可溶表达. 抑菌实验结果表明, 重组蛋白SjLys-C具有较高的抑菌活性; 经100 ℃处理40 min后, 蛋白SjLys-C的抑菌活性提高. 分子动力学(MD)模拟表明, SjLys-C蛋白具有高度的热稳定性, 蛋白热处理后未变性, 仍维持完整的三级结构. 但在热处理过程中, SjLys-C多肽的氨基酸残基随温度变化发生内部结构的重排. 其中C端区、 N端区和活性区域(10~20)内氨基酸残基的柔性增加, 蛋白整体构象展开, 导致被包埋在内部的2个活性位点(Ser18, His48)暴露, 并且它们之间的距离缩短; 而活性区域(37~47)内氨基酸残基的构象调整, 导致区域结构紧凑, 使2个活性位点间的距离改变.

%U http://www.cjcu.jlu.edu.cn/CN/10.7503/cjcu20131144